亚洲aⅴ无码国精品中文字慕-亚洲aⅴ无码日韩av无码网站-亚洲AⅤ优女AV综合久久久-亚洲avav天堂av在线网毛片-亚洲AV成人一区二区三区观看-亚洲av东京热一区二区

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網(wǎng)站!
本站熱搜:科研細胞 | 生化試劑 | 食品農(nóng)殘檢測 | 動物ELISA試劑盒 | IL-4 | IL-6 | VEGF | TNF-A
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > ELISA試劑盒實驗技術(shù)要點

    ELISA試劑盒實驗技術(shù)要點

    發(fā)布時間: 2015-06-05  點擊次數(shù): 1990次

        ELISA試劑盒的結(jié)果判定分為定性和定量兩種 ,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結(jié)果如何判斷呢?專業(yè)人士為您解析:
    (1)間接法和夾心法
    這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反應(yīng)后常可出現(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結(jié)果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。
    目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應(yīng)該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
    a.陽性判定值 
    陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù),以此作為判斷結(jié)果陽性或陰性的標準。
    用此法判斷結(jié)果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應(yīng)符合一定的規(guī)格,須配用精密的儀器,并嚴格按規(guī)定操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。現(xiàn)舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設(shè)2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(shù)(NCX)和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個特定的數(shù)值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陽性判定值=NCX+0.05,標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應(yīng)注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
    根據(jù)以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質(zhì)控作用,試劑變質(zhì)和操作不當均會產(chǎn)生"試驗無效"的后果。
    b.標本/陰性對照比值 
    在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,ELISA試劑盒這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,ELISA試劑盒這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應(yīng)誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標準,現(xiàn)多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統(tǒng)應(yīng)該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設(shè)陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類試劑盒規(guī),如N<0.05(或其他數(shù)值),則按0.05計算,否則將出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

    (2)競爭法
    在競爭法ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應(yīng)中酶結(jié)合物的濃度和加入競爭抑制物的量,一般調(diào)節(jié)陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此時反應(yīng)zui為敏感。
    競爭法ELISA不易用自視判斷結(jié)果,因肉眼很難辨別弱陽性反應(yīng)與陰性對照的顯色差異,一般均用比色計測定,讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種,即陽性判定值法和抑制率法。
    a. 陽性判定值法
    與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同,ELISA試劑盒但在計算公式中引入陽性對照A值,現(xiàn)舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復(fù)鈣人血漿,陽性對照中抗HBc含量為125±100u/ml。每次試驗設(shè)2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均值(NCX)和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(N-P)必須大于一個特定的數(shù)值(例如0.300),試驗才有效。3個陰性對照A值均應(yīng)小于2.000,而且應(yīng)≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而以另2個陰性對照重新計算×NCX;如有2個陰性對照A超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX,標本A值≤陽性判定值的反應(yīng)為陽性,A>陽性判定值的反應(yīng)為陰性。 
    b. 抑制率法 
    抑制率表示標本在競爭結(jié)合中標本對陰性反應(yīng)顯色的抑制程度,ELISA試劑盒按下式計算:
    抑制率(%)= (陰性對照A值-標本A值)×100%/陰性對照A值,一般規(guī)定抑制率≥50%為陽性,<50%為陰性。

產(chǎn)品中心 Products
在線客服 聯(lián)系方式

服務(wù)熱線

021-54479081
021-54461587

女人扒开腿让男人狂桶30分钟| 九九久久99综合一区二区| 男人放进女人里面叫什么| 9人妻人人澡人人爽人人精品| 人人人人人人一摸| 国产好爽…又高潮了毛片 | 男人把女人桶到爽免费应用 | 久久996RE热这里有精品| 中国凸偷窥XXXX自由视频| 秋霞A级毛片在线看| 国产大学生粉嫩无套流白浆| 亚洲国产不卡久久久久久| 乱公和我做爽死我视频| 宝贝腿开大一点你真湿H| 无码人妻丰满熟妇区免费| 久久99精品久久久久久蜜芽| 91无码人妻精品一区二区蜜桃| 色ww1区2区在线观看| 韩国青草无码自慰直播专区| 在线天堂资源WWW在线中文 | 久久久久无码专区亚洲AV| AV天堂东京热无码专区| 天美传媒MV高清版在线观看| 激情偷乱人伦小说免费看| 18性欧美XXXⅩ性满足| 日韩无码视频一区二区三区| 国产偷自视频区视频| 在线观看特色大片免费视频| 日韩精品久久久肉伦网站| 国产亚洲无线码一区二区| 在床上拔萝卜又疼又叫什么症状 | 亚洲中文字幕久久精品无码VA| 欧洲肉欲K8播放毛片| 国产欧美VA欧美VA香蕉在| 永久免费不卡在线观看黄网站 | 东京热无码AV男人的天堂| 亚洲丰满熟妇乱XXXXX网站| 妺妺窝人体色WWW在线一| 国产成人8X视频网站| 我国产码在线观看AV哈哈哈网站 | 男男车车的车车网站W98免费| 丰满妇女伦大片免费| 亚洲欧美国产精品久久| 秋霞午夜成人久久电影网| 国产午夜福利精品久久2021| 坐公交忘穿内裤被挺进老| 天堂А√在线中文在线新版| 久久久精品人妻一区二区三区 | 亚洲中文久久精品无码照片| 日本XXXX裸体XXXX在线观| 韩国理伦电影午夜三级| 亚洲一区无码精品色| 蜜桃国产乱码精品一区二区三区| 绯色AV一区二区三区蜜臀| 亚洲熟妇丰满多毛XXXX| 日本在线 | 中文| 国产精品人成视频免费播放| 一二三四在线看日本高清| 女人无遮挡无内衣内裤网站| 国产精品福利一区二区| 在线人成视频播放午夜福利| 玩弄chinese丰满人妻| 裸体美女扒开下部无遮挡网站免费| 国产AⅤ无码专区亚洲AV麻豆 | 无码少妇一区二区| 免费一对一刺激互动聊天软件| 国产精品久久久久久一区二区三区| 中国VIDEOSEX高潮对白H| 我跟闺蜜公交车被弄到高潮| 蜜桃视频一区二区三区在线观看| 国产精品免费一区二区三区四区| 最新高清无码专区| 小怡的暴露耻辱系列小说| 欧美啪啪抽搐一进一出免费| 国内精品自线一区麻豆| 暴躁老阿姨CSGO攻略大全| 亚洲精品自偷自拍无码| 色综合久色AⅤ网| 麻豆国产丝袜白领秘书在线观看| 国产精品亚洲专区无码唯爱网| 亚洲日韩精品一区二区三区无码 | 久久久久久久亚洲AV无码| VODAFONEWIFI暴力| 亚洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 日韩v亚洲v欧美v精品综合| 久久久国产精华液| 国产精品国产AV片国产| 99久久久精品免费观看国产| 亚洲AV无码一区二区三区久久精| 人妻少妇久久久久久97人妻| 久久精品国产成人AV| 国产激情久久久久久熟女老人| 97SE狠狠狠狠狼亚洲综合网| 亚洲成AV不卡无码无码不卡| 日韩视频一区二区三区| 裸身美女无遮挡永久免费视频| 国产欧美久久久久久精品一区二区 | 少妇精品久久久久www| 免费无码午夜福利片| 韩国电影办公室的在线观看 | 久久亚洲人成网站| 国产欧美一区二区三区在线看| JAPANESE人妻少妇| 性少妇FREESEXVIDEO| 人妻AV中文字幕无码专区| 久久久久亚洲精品无码网址色欲| 国产精品自产Av一区二区三区| ZOMBIE老头SUPREME| 永久黄网站色视频免费品善网| 亚洲AⅤ无码精品一区二区三区| 日本最大但人文艺术欣赏的背景| 裸体欣赏ⅤIDE0SPH0TO| 好了AV四色综合无码久久| 短乱俗小说500篇免费下载| 9999久久久久精品无码| 无码人妻丝袜视频在线播免费 | 久久国产精品无码一区二区三区| 国产精品拍天天在线| 差差漫画页面在线阅读弹窗在线看 | 日韩丰满少妇无吗视频激情内射 | 国产在线精品99一区不卡| 丰满人妻被黑人连续中出| AV人摸人人人澡人人超碰妓女| 亚洲综合色丁香婷婷六月图片| 日韩少妇人妻夜夜爽| 女人18毛片A级女人18水真多| 久久AⅤ天堂AV无码AV| 国产午夜精品一区二区| 跪趴式啪啪GIF动态图27报| 一区蜜桃中文不卡在线| 亚洲GV永久无码天堂网| 挺进美妇肉蚌深处| 日产乱码一二三区别免费影视 | 亚洲AV成人一区国产精品小说| 色婷婷亚洲婷婷七月中文字幕| 欧美人与性动交α欧美精品| 久久亚洲精品无码| 精品人妻少妇一级毛片免费| 国产午夜福利片1000无码| 公的粗大挺进了我的密道视频 | 无码AV天堂一区二区三区| 日本免码VA在线看免费最新| 久久久久久久99精品国产片| 国产自偷在线拍精品热 | CHINESE猛攻打桩大学生| 再深点灬舒服灬太大了网站 | 抖抈短视频APP免费下载| ワンピースのエロ.WWW在线| 亚洲一区二区三区成人网站| 亚洲AV无码国产精品色午夜| 无码人妻精品中文字幕| 熟妇啊轻点灬大JI巴太粗| 日韩精品卡2卡3卡4卡5| 人妻天天爽夜夜爽一区二区| 久久九九久精品国产| 禁18在线观看免费网站| 国外免费B2B网站| 国产熟妇人妻ⅩXXXX麻豆网站| 国产成人最新三级在线视频| 丰满少妇偷人51视频在线观看| 成 人 A V免费视频在线观看| ZOOM人牛OKZOOM| H漫无码动漫AV动漫在线播放| 2023国精产品一二二线精华液| 中文字幕丰满乱子无码视频| 又湿又紧又大又爽A视频| 伊人久久大香线蕉精品| 艳妇乳肉豪妇荡乳ⅩXX| 亚洲综合国产成人无码| 亚洲一区二区无码成人AV| 亚洲熟妇少妇任你躁在线观看| 亚洲乱妇老熟女爽到高潮的片| 亚洲国产精品一区二区久久HS| 亚洲国产欧洲综合997久久| 亚洲国产成人无码AV在线播放| 亚洲妇女水蜜桃AV网网站| 亚洲国产成人综合在线不卡| 亚洲S久久久久一区二区| 亚洲—本道 在线无码AV发| 亚洲国产成人无码影片在线播放| 亚洲国产区男人本色| 亚洲国产午夜精品理论片| 亚洲精品无码鲁网中文电影| 亚洲欧美日韩、中文字幕不卡| 亚洲乱色熟女一区二区三区蜜臀| 亚洲人成自拍网站在线观看| 亚洲色精品88色婷婷七月丁香| 亚洲一区二区三区无码影院| 伊人精品成人久久综合| 中国丰满熟妇XXXX性| 综合亚洲另类欧美久久成人精品| 8V蜜桃网最新电影| FREE俄罗斯免费视频| 超碰97人人做人人爱亚洲尤物| 成人午夜精品久久久久久久| 丰满少妇女裸体BBW| 国产精品久久久久久AV | 波多野无码中文字幕AV专区 | 3D动漫精品啪啪一区二区中| A级大胆欧美人体大胆666|